酶標(biāo)儀的自檢標(biāo)準(zhǔn)
1.外觀酶標(biāo)儀上應(yīng)有儀器名稱(chēng),型號(hào),編號(hào),生產(chǎn)廠家,出廠日期和電源電壓;各調(diào)節(jié)旋鈕,按鍵和開(kāi)關(guān)均能正常工作,外表面無(wú)明顯機(jī)械損傷;顯示文字應(yīng)清楚完整。
2.酶標(biāo)儀的穩(wěn)定性(漂移)選用492nm波長(zhǎng),在吸光度0.0A處,測(cè)定標(biāo)稱(chēng)值為1.0A的光譜中性濾光片(測(cè)定操作按儀器說(shuō)明進(jìn)行),記錄儀器示值或均值,10min后再次記錄儀器示值或均值,前后兩次測(cè)定值之差不應(yīng)超過(guò)±0.005A。
3.吸光度測(cè)定的準(zhǔn)確度選用405,492和620 nm波長(zhǎng),以空氣為參比,分別測(cè)定標(biāo)稱(chēng)值為0.5和1.0A的光譜中性玻璃濾光片,用測(cè)試板代替酶標(biāo)板,按儀器說(shuō)明連續(xù)測(cè)定3次,按下式計(jì)算準(zhǔn)確度:AA=1/3(A、+A。+A3)—A:(A:為標(biāo)準(zhǔn)值)。
酶標(biāo)儀的分類(lèi)
光吸收酶標(biāo)儀:是用來(lái)進(jìn)行可見(jiàn)光與紫外光吸光度的檢測(cè),特定波長(zhǎng)的光通過(guò)微孔板中的樣品后,光能量被吸收,而被吸收的光能量與樣品的濃度呈一定的比例關(guān)系,由此可以用來(lái)定性和定量的檢測(cè),光吸收的檢測(cè)技術(shù)成熟,成本低,操作簡(jiǎn)單,但是動(dòng)態(tài)范圍窄,靈敏度比較低,特異性不強(qiáng),一般可見(jiàn)光和紫外光分別采用鎢燈作為光源,而紫外/可見(jiàn)酶標(biāo)儀是可以將兩種光源進(jìn)行切換,適應(yīng)不同測(cè)量波長(zhǎng)的需求。
熒光酶標(biāo)儀:是用來(lái)進(jìn)行熒光的檢測(cè),通過(guò)激發(fā)光柵分光后的特定波長(zhǎng)的光照射到被熒光物質(zhì)標(biāo)定的樣品上后,會(huì)發(fā)出波長(zhǎng)更長(zhǎng)的發(fā)射光,通過(guò)發(fā)射光柵后到達(dá)檢測(cè)器,熒光的強(qiáng)度與樣品的濃度呈一定的比例,熒光檢測(cè)靈敏度高,可實(shí)時(shí)檢測(cè),使用方便,檢測(cè)模式多樣,但是容易受外界干擾,激發(fā)光與發(fā)射光容易互相影響,干擾檢測(cè)。
使用酶標(biāo)儀約見(jiàn)的故障及解決方法
霍爾元件故障該儀器多處使用霍爾元件,條碼閱讀器,試劑轉(zhuǎn)盤(pán),樣品轉(zhuǎn)盤(pán)等等。當(dāng)此元件發(fā)生故障時(shí),則跟隨位置錯(cuò)誤的報(bào)警。該儀器使用的霍爾元件分左右側(cè),可以共用輸入信號(hào),更換后須校正位置。
比色部分故障光源通過(guò)八根光纖被傳送到比色部分,進(jìn)反應(yīng)板一端的光纖頭容易受液體污染,當(dāng)出現(xiàn)某一孔或幾孔比色異常時(shí),需要先清潔光纖頭。接收端的信號(hào)檢測(cè)板被液體浸泡或塵粒過(guò)多,也會(huì)造成比色異常。
加樣臂部分故障日常保養(yǎng)時(shí),注意檢查軸承等機(jī)械部件的磨損情況,做好清潔潤(rùn)滑。因皮帶形變或機(jī)械磨損會(huì)造成加樣坐標(biāo)(X/Y/Z)偏差,可通過(guò)調(diào)整對(duì)應(yīng)步進(jìn)電機(jī)步數(shù)來(lái)進(jìn)行修正,必要時(shí)需更換新皮帶。
酶標(biāo)儀所的軟件功能
軟件功能是指酶標(biāo)儀所具有的對(duì)ELISA定性和定量測(cè)定及其他測(cè)定方式如酶標(biāo)動(dòng)力學(xué)、紫外和凝集等數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析并報(bào)告結(jié)果的功能。軟件功能是酶標(biāo)儀的一個(gè)非常重要的功能。如果硬件方面區(qū)別不大,則軟件就成為判定酶標(biāo)儀優(yōu)劣的指標(biāo)。對(duì)于用戶(hù)來(lái)說(shuō),好的軟件功能,對(duì)實(shí)際工作會(huì)有較大的幫助。ELISA定性測(cè)定,酶標(biāo)儀如具有陽(yáng)性判斷值(cut-off)及其測(cè)定“灰區(qū)”(即指測(cè)定吸光度處于cut—off周?chē)囊欢▍^(qū)域)的統(tǒng)計(jì)計(jì)算功能,不但方便了實(shí)驗(yàn)室工作人員,而且在某些特定的情況下,有很高的實(shí)用價(jià)值。因此,如目的是定量測(cè)定,則在酶標(biāo)儀的軟件功能中,要有這種曲線回歸方程計(jì)算分析功能。其他諸如連點(diǎn)、直線等回歸計(jì)算,則可根據(jù)酶標(biāo)儀的應(yīng)用目的而定,如兼用于微量生化測(cè)定,則此類(lèi)回歸計(jì)算就很有必要。
此外,酶標(biāo)儀兼做酶標(biāo)動(dòng)力學(xué)、凝集反應(yīng)測(cè)定所需的軟件是否應(yīng)具備,當(dāng)然也應(yīng)根據(jù)使用目的而定。由于此類(lèi)軟件一般都較為昂貴,酶標(biāo)儀常另外單獨(dú)按需配備,如果不是實(shí)驗(yàn)室特殊需要,就不必強(qiáng)求這種軟件功能。