7分鐘前 分子病理技術(shù)服務(wù)承諾守信「科銳諾」[科銳諾44070b2]內(nèi)容：

意義

在研究DNA分子原理的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種技術(shù)。其基本原理是兩條核苷酸單鏈片段，在適宜的條件下，能過氫鍵結(jié)合，形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 雙鍵分子的特點(diǎn)，應(yīng)用帶有標(biāo)記的（有性同位素，如3H、35S、32P、熒光素生物素、等非性物質(zhì)）DNA或RNA片段作為核酸探針，與組織切片或細(xì)胞內(nèi)待測(cè)核酸（RNA或DNA）片段進(jìn)行雜交，然后可用自顯影等方法予以顯示，在光鏡或電鏡下觀察目的 mRNA或DNA 的存在并定位；用原位雜交技術(shù)，可在原位研究細(xì)胞合成某種多肽或蛋白質(zhì)的基因表達(dá)。此方法有很高的敏感性和特異性，可進(jìn)一步從分子水平來探討細(xì)胞的功能表達(dá)及其調(diào)節(jié)機(jī)制。已成為當(dāng)今細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)研究的重要手段。

首先，分子病理診斷為的診斷及鑒別診斷提供了依據(jù)，當(dāng)遇到少見疑難或罕見病例時(shí)，尤其是通過形態(tài)學(xué)和免yi組化染色仍不能確定的類型，這時(shí)候就需要借助分子病理技術(shù)，從基因水平來判斷疾病的異常情況，協(xié)助病理醫(yī)生作出相對(duì)準(zhǔn)確的診斷并判斷該疾病的預(yù)后及轉(zhuǎn)歸。應(yīng)用領(lǐng)域廣泛的要數(shù)軟組織和骨、淋巴造血系統(tǒng)，因?yàn)檫@些系統(tǒng)的相似而不同，單靠鏡下表現(xiàn)和已知的已無法滿足診斷需求。另外，分子病理檢測(cè)也常常運(yùn)用在分子分型中，比如大家熟知的分子分型，通過基因表達(dá)譜研究，可將分為管腔A型、B型，HER-2陽(yáng)性型，基底樣型。

分子病理檢測(cè)的意義：

通過分子檢測(cè)協(xié)助病理診斷

某些腫1瘤具有特定的分子病理學(xué)改變，對(duì)于病理常規(guī)染色難于診斷的這些腫1瘤，進(jìn)行分子病理檢測(cè)可協(xié)助得出準(zhǔn)確的病理診斷。例如淋巴1瘤的鑒別診斷往往依賴于形態(tài)和免1疫組化的綜合判斷，但有些時(shí)候，這些手段也不能滿足診斷的需要，這時(shí)我們通過IG或TCR基因重排檢測(cè)，可協(xié)助鑒別淋巴細(xì)胞的普通增殖和腫1瘤性增殖。

滴加封閉液：37℃30分鐘。甩去多余液體，不洗。

.滴加生物素化鼠抗地1高辛：37℃ 60分鐘或室溫120分鐘。原位雜交用PBS洗5分鐘×4次。勿用其它緩沖液和蒸餾水洗滌。

滴加SABC：37℃20分鐘或室溫30分鐘。原位雜交用PBS洗5分鐘×3次。勿用其它緩沖液和蒸餾水洗滌。

滴加生物素化過氧化物酶：37℃20分鐘或室溫30分鐘。原位雜交用PBS洗5分鐘×4次。

DAB顯色：使用DAB顯色試劑盒—1ml蒸餾水加顯色劑Ａ，Ｂ，C各一滴，混勻，加至標(biāo)本上。一般顯色20-30分鐘。若無背景出現(xiàn)則可繼續(xù)顯色。也可自配DAB顯色劑后顯色。充分水洗。

.蘇1木素復(fù)染，充分水洗。

酒精脫水，二甲1苯透明，封片。