病理實驗外包，冰凍切片取樣實驗步驟：一、 取材應盡可能快地采取新鮮的材料，防止組織發(fā)生死后變化。二、速凍1. 將組織塊平放于軟塑瓶蓋或小盒內（直徑約2 cm）。2. 如組織塊小可適量加OCT包埋劑浸沒組織，然后將小盒緩緩平放入盛有液氮的小杯內。3. 當盒底部接觸液氮時即開始氣化沸騰，此時小盒保持原位切勿浸入液氮中，大約10~20 s組織即迅速冰結成塊。4 在制成凍塊后，即可置入恒冷箱切片機冰凍切片。5. 若需要保存，應快速以鋁箔或塑料薄膜封包，立即置入-80℃冰箱貯存?zhèn)溆?。三、固?. 樣品托上涂一層OCT包埋膠，將速凍組織置于其上，4℃冰箱預冷5~10 min 讓OCT膠浸透組織?！驹炷７椒ā縎pragueDawley大鼠，雄性，平均體重170g。2. 取下組織置于錫箔或者玻片上，樣品托速凍。3. 組織置于樣品托上，其上再添一層OCT膠，以完全覆蓋為宜，速凍架（PE）上30 min。

病理實驗外包，染色常見染色介紹天狼星紅染色：主要由天狼星紅染色液、Mayer 素染色液組成，主要用 于各種組織病變時對膠原纖維異常或纖維的研究中，在普通光學顯微鏡下心臟血管等組 織的膠原纖維被染成紅色，在偏振光鏡下對各種纖維化病變的分型和分級研究有一定的幫助 作用。采用組化技術也可顯示Ⅰ、Ⅲ型膠原纖維，但所用昂貴，操作費時，而采用 天狼星紅染色試劑便宜，操作簡單。通過發(fā)射電子束從而穿過超薄的樣品，同時與樣本相互作用，既而形成圖像。

天狼星紅染色液操作步驟

1、組織固定于 10%固定液，常規(guī)脫水包埋。

2、切片厚 6μm，常規(guī)脫蠟至水。

3、天狼星紅染色液滴染 1h。

4、流水稍沖洗，去除切片表面染液。

5、Mayer 素染色液染細胞核 8～10min。

6、流水沖洗 10min。

7、常規(guī)脫水透明，中性樹膠封固。 天狼星紅染色可用作肝纖維化以及纖維化模型的定性與膠原纖維沉積的半定量分析。南京英瀚斯，的病理染色實驗服務平臺。

病理實驗外包，病理染色常見染色介紹Von Kossa染色：簡介：鈣結節(jié)的形成為成骨細胞特有，Von kossa染色法是染色礦化結節(jié)的經典方法，利用與鈣鹽的復分解反應形成可被還原的銀鹽，在強光或紫外光下或者強還原劑作用下使其還原為黑色的金屬銀。過氧化物酶能把許多胺類氧化為有色化合物，用聯ben胺處理標本，細胞實驗中細胞內的過氧化物酶能把聯ben胺氧化為藍色的聯ben胺藍，進而變?yōu)樽厣a物，因而可以根據顏色反應來判定過氧化物酶的有無或多少。

簡要流程：石蠟切片/細胞爬片/冷凍切片→脫蠟至水→滴染→素染核→伊紅染色→脫水、透明、封片（中性樹膠）→Von kossa染（鈣鹽沉積區(qū)域呈黑色或棕黑色，細胞核呈藍色，背景呈紅色；mian疫組化半定量分析各組小鼠α-sma表達差異面對著色深淺不一的組化切片用肉眼觀察的結果只能是定性的，不準確的?；蛘哜}鹽沉積區(qū)域呈黑色或棕黑色，背景呈紅色）。Von Kossa染色利用金屬離子置換反應檢測組織中鈣鹽沉積，由溶液中的銀離子置換組織中沉積的鈣離子。

該染色可用于血管鈣化的檢測

病理實驗外包，病理染色常見染色介紹熒光染色：熒光技術（Immunofluorescence technique ）又稱熒光技術，是標記技術中發(fā)展早的一種。它是在學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。熒光示蹤或檢查相應抗原的方法稱熒光法；用已知的熒光抗原標記物示蹤或檢查相應的方法稱熒光抗原法。這兩種方法總稱熒光技術。在實際工作中熒光抗原技術很少應用，所以人們習慣將熒光技術稱為熒光技術。學的基本反應是抗原-反應。由于抗原反應具有高度的特異性，所以當抗原發(fā)生反應時，只要知道其中的一個因素，就可以查出另一個因素。該染色方法可用于模型，用于顯示小球病變中糖原沉積，基底膜增厚。熒光技術就是將不影響抗原活性的熒光色素標記在（或抗原）上，與其相應的抗原（或）結合后，在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。南京英瀚斯，的病理染色實驗服務平臺。