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3分鐘前 廣安實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型公司了解更多 英瀚斯生物科技[英瀚斯2eefa30]內(nèi)容:小鼠急性肺yan模型構(gòu)建方法案例

三、實(shí)驗(yàn)指標(biāo)區(qū)域指標(biāo)開臂1停留時(shí)間、活動(dòng)路程、進(jìn)入次數(shù)、潛伏期、平均速度(X軸投影速度)開臂2停留時(shí)間、活動(dòng)路程、進(jìn)入次數(shù)、潛伏期、平均速度(X軸投影速度)開臂3停留時(shí)間、活動(dòng)路程、進(jìn)入次數(shù)、潛伏期、平均速度(X軸投影速度)其他臂停留時(shí)間、活動(dòng)路程、進(jìn)入次數(shù)、潛伏期、平均速度(X軸投影速度)四、實(shí)驗(yàn)方法及應(yīng)用

1) 動(dòng)物適應(yīng)實(shí)驗(yàn)環(huán)境1周后,稱重,禁食24小時(shí)。此后每天訓(xùn)練結(jié)束后限制性地給予正常食料(據(jù)體重不同,大鼠16-20g,小鼠2-3g),以使體重保持在正常進(jìn)食大鼠的80%~85%。

2) 第二天,迷宮各臂及中央?yún)^(qū)分撒著食物顆粒(每只4~5粒,直徑約3~4mm)。然后,同時(shí)將4只動(dòng)物置于迷宮中央(通往各臂的門打開)。讓其自由攝食、探究10min。

3) 第三天,重復(fù)第二天的訓(xùn)練。這一過程讓動(dòng)物在沒有很強(qiáng)的應(yīng)激條件下熟悉迷宮環(huán)境。

4) 第四天起,動(dòng)物單個(gè)進(jìn)行訓(xùn)練:在每個(gè)臂靠近外端食盒處各放一顆食粒,讓動(dòng)物自由攝食。食粒吃完或10min后將動(dòng)物取出。

5) 第五天,將食物放在食盒內(nèi),重復(fù)前一天的訓(xùn)練,一天2次。

6) 第六天以后,隨機(jī)選4個(gè)臂,每個(gè)臂放一顆食粒;各臂門關(guān)閉,將動(dòng)物放在迷宮中央;30s后,臂門打開,讓動(dòng)物在迷宮中自由活動(dòng)并攝取食粒,直到動(dòng)物吃完所有4個(gè)臂的食粒。如經(jīng)10min食粒仍未吃完,則實(shí)驗(yàn)終止。每天訓(xùn)練兩次,其間間隔1h以上。

siRNA 的作用原理

利用短寡核苷酸 siRNA 或能夠轉(zhuǎn)錄 siRNA 的 DNA 質(zhì)粒將雙鏈 RNA (dsRNA) 引入細(xì)胞。細(xì)胞中的 Dicer 蛋白將 dsRNA 消化為 21 bp 的 dsRNA (siRNA)。 siRNA 被整合到 RNA 誘導(dǎo)沉默復(fù)合體 (RISC) 中。在 RISC 復(fù)合體中,dsRNA 發(fā)生鏈分離。其反義鏈與細(xì)胞中的互補(bǔ)/靶 mRNA 雜交。活化 RISC 中的核酸酶降解靶 mRNA。斷裂的 mRNA 無法翻譯成蛋白質(zhì)。也就是說蛋白質(zhì)無法表達(dá),從而成功“敲除”蛋白質(zhì)。

小鼠急性肺yan模型構(gòu)建方法案例

急性肺yan:

急性肺yan是指肺部發(fā)生急性的yan癥反應(yīng),通常是由細(xì)菌、病毒或其他微生物gan染引起的。急性肺yan的主要癥狀包括發(fā)熱、咳嗽、咳痰、胸痛和呼吸困難。急性肺yan的嚴(yán)重程度因人而異,有些人可以在家中服用抗sheng素或抗病毒yao物zhi療,有些人則需要住院接受氧氣zhi療或人工呼吸器支持。急性肺yan如果不及時(shí)診斷和zhi療,可能會(huì)導(dǎo)致呼吸衰竭、敗xue癥、心臟驟停或si亡。

實(shí)驗(yàn)材料

C57BL/6小鼠

LPS

方法步驟

1、小鼠禁食不禁水12h 。

2、使用戊ba比妥鈉(30mg/kg)腹腔ma醉,固定于板上

3、使用10mg/ml(50ul/只)的給藥劑量滴入小鼠咽喉壁,并捏住鼻子約20-30s后松開。

4、誘導(dǎo)后小鼠正常飼養(yǎng)觀察。

實(shí)驗(yàn)案例

給藥2小時(shí)后,HE染色開始出現(xiàn)炎細(xì)胞浸潤

6小時(shí)明顯炎細(xì)胞浸潤并肺泡壁增厚

12小時(shí)很少見到正常形態(tài)的肺泡結(jié)構(gòu)

24小時(shí)肺泡壁明顯增厚

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